» »

Значение анализов на антитела IgG, IgM, IgA в диагностике инфекций. Анализ на сифилис ИФА — расшифровка анализа

23.10.2020

Методика иммуноферментного анализа применяется в различных отраслях медицины. Но в большинстве случаев данным методом диагностируют широкий круг инфекционных заболеваний, таких как вирус иммунодефицита человека, гепатит, герпес и прочих инфекций половых органов. Также иммуноферментный анализ применяют для выявления онкомаркеров различного происхождения, определения гормонов и при диагностике репродуктивной функции организма. Материалом для иммуноферментного исследования является кровь человека.

Что это такое

Иммуноферментный анализ крови – это лабораторное иммунологическое исследование крови, при котором происходят качественные и количественные измерения антител (антигенов), а также гормонов. Этот метод предоставляет до 90% точности при установлении диагноза заболевания.

Медицинские лаборатории используют несколько вариантов его проведения, что влияет на срок готовности результатов. Но в среднем выдача результатов исследования происходит в период 1-10 дней после сдачи крови.

Какие антитела проверяют

При данном виде анализа крови устанавливаются антитела разных видов – это иммуноглобулины класса M, A, G (JgM, JgA, JgG). Их накопление происходит в различные временные промежутки. Первыми начинают проявляться иммуноглобулины класса М (пятый день после начала болезни). Такие иммуноглобулины задерживаются в организме пять-шесть недель, после чего начинают исчезать из крови организма. Именно в данный период времени выявляются антитела класса М.

Вторыми проявляются иммуноглобулины класса G (через три-четыре недели). Они задерживаются в организме несколько месяцев или лет. Во время проведения иммуноферментного анализа крови и расшифровки его результата можно обнаружить возрастание антител класса G. Это свидетельствует о наличии инфекции или реинфекции.

Антитела класса А проявляются в крови на протяжении двух-четырех недель. Но всего лишь 20% из них присутствуют в сыворотке крови. Остальные же входят в состав секрета слизистых оболочек. Иммуноглобулины класса А начинают исчезать в промежутке времени от двух недель до двух месяцев. Данный процесс является свидетельством уничтожения инфекции в организме. Если после выздоровления человека проводился повторный иммуноферментный анализ крови и расшифровка результата показала наличие антител класса А – это свидетельство хронической инфекции.

Расшифровка анализа

Расшифровка результатов анализа может принимать такие значения:

  • JgM (-), JgG (-), JgA (-) – отсутствие иммунитета к инфекции;
  • JgM (-), JgG (+), JgA (-) – наличие поствакционного или постинфекционного иммунитета;
  • JgM (+), JgG (-/+), JgA (-/+) – наличие острой инфекции;
  • JgM (+), JgG (+), JgA (+) – наличие обострения хронической инфекции;
  • JgM (-), JgG (+/-), JgA (+/-) – наличие хронической инфекции;
  • JgM (-) – выздоровление.

В расшифровке (+) является положительным результатом, а (–) – отрицательным результатом.

Помимо уточнения классов антител в расшифровке встречаются количественные их показатели. Но обширное их объяснение может предоставить только лечащий врач.

Сыворотка крови – это прозрачная жидкость с желтым оттенком. После свертывания крови она отделяется от кровяного сгустка. Не содержит фибрина и форменных элементов.

Иммуноферментный анализ сыворотки крови основан на взаимодействии антигена с антителом, причем один из них содержит в своей структуре фермент. При взаимодействии двух компонентов содержимое пробирки должно менять свой цвет. Результаты сравниваются со стандартной цветовой шкалой, и далее устанавливается антиген, который присутствует в материале. Другими словами принцип иммуноферментного анализа сыворотки крови можно объяснить так:

  1. подготавливаются наборы антигенов (например, возбудители инфекционных заболеваний, аллергены или гормоны);
  2. пациент сдает кровь на анализ, из которой в лаборатории выделяется сыворотка;
  3. материал для исследования добавляется в лунки готовых наборов, после чего возникает реакция антиген-антитело;
  4. оставшаяся сыворотка крови убирается, а обнаруженные антитела распознаются при помощи индикаторов.

Иммуноферментный анализ сыворотки крови считается достоверным. Но в тех случаях, когда произошло неправильное взятие крови для анализа, или была нарушена техника проведения исследования, или же имеются у человека скрытые системные заболевания, результаты иммуноферментного анализа сыворотки крови могут оказаться ложными.

Иммуноферментный анализ сыворотки крови исследует практически все гормоны щитовидной железы, онкомаркеры и различные виды инфекций.

К гормонам щитовидной железы относятся тиреоглобулин (ТГ), тироксин (Т4), трийодтиронин (Т3), свободный тироксин (Т4), свободный трийодтиронин (Т3).

Нормы

Иммуноферментный анализ крови в норме считается, если присущи такие допустимые нормы гормонов щитовидной железы:

  • тиреоглобулин (ТГ) – допустимые границы 70 МЕ/мл;
  • тироксин (Т4) – 64-146 нмоль/л (50-113 нг/мл);
  • трийодтиронин (Т3) – 1,8-2,8 нмоль/л (0,8-2,0 нг/мл);
  • свободный тироксин (Т4) – 11-25 пмоль/л (10-27 пг/мл);
  • свободный трийодтиронин (Т3) – 4,49-9,3 пмоль/л (2,5-5,8 пг/мл).

В случае исследования половых гормонов иммуноферментный анализ крови в нормедля женщин считается, если в организме выделяется лютеинизирующий гормон (ЛГ) в таких пределах:

  • фолликулярная фаза цикла (с первого дня месячных до двенадцатого-четырнадцатого) – 2-14 мЕд/л;
  • овуляционная фаза цикла (с двенадцатого дня по четырнадцатый день) – 24-150 мЕд/л;
  • лютеиновая фаза цикла (с пятнадцатого-шестнадцатого дня и до начала следующих месячных) – 2-17 мЕд/л.

В норме для мужчин принимается, если половой гормон вырабатывается в пределах 0,5-10 мЕд/л.

При исследовании хронического гонадотропина (ХГ) референсные значения зависят от пола человека.

  • У взрослых мужчин и небеременных женщин нормой считается уровень ХГ ниже 5мЕд/мл.
  • У беременных женщин результат зависит от срока беременности и может колебаться в пределах 25-49000 мЕд/мл.

Иммуноферментный анализ крови исследует множество онкологических показателей. К ним можно отнести наличие пролактина, эстрадиола, прогестерона, тестостерона, стероид связывающего глобулина (ССГ) и других маркеров. Но интерпретация результата анализа и норм этих показателей должна проводиться только лечащим врачом.

Кроме того, данный метод диагностирует инфекционные (например, краснуха, корь, туберкулез, герпес, сифилис, гепатит, псевдотуберкулез) и аутоиммунные заболевания разного вида, а также устанавливает иммунный статус человека. Но все показатели и полученные результаты должны расшифровываться квалифицированным специалистом.

4.5 4.50 из 5 (6 Голосов)

В современной лабораторной диагностике инфекционных болезней широкое применения нашел метод иммуноферментного исследования крови (ИФА), основанный на обнаружении специфических, характерных для возбудителей антител.

В чем суть метода?

Чтобы это понять, следует знать, как работает иммунная система человека, что такое антиген, антитела, какие функции они выполняют.

  • Антиген в нашем организме представляет собой молекулу, которая специфично связывается с антителом. Он переносит определенную информацию о клетке.
  • Когда в кровь попадает чужеродный антиген, начинают вырабатываться антитела (иммуноглобулины Ig), которые распознают его и стремятся уничтожить.
  • Такое взаимодействие называется иммунным комплексом, на котором и основан метод диагностики ИФА.
  • Анализ позволяет определить уровень гормонов, иммуноглобулинов, иммунологических комплексов и других биологически активных веществ, поэтому важен для комплексной диагностики .

Кому показана диагностика?

Специалист может назначить исследование с целью:

По сравнению с другими методами исследования ИФА обладает целым рядом преимуществ:

Задайте свой вопрос врачу клинической лабораторной диагностики

Анна Поняева. Закончила нижегородскую медицинскую академию (2007-2014) и Ординатуру по клинико-лабораторной диагностике (2014-2016).

Из недостатков можно отметить возможную неточность расшифровки . Иногда анализ показывает ложноотрицательный или ложноположительный результат, особенно при неправильной подготовке или нарушении техники выполнения.

Как выполняется?

Процедура ничем не отличается от взятия материала для .

  • После назначения анализа пациент направляется в лабораторию для забора венозной крови. Процедура проводятся утром на голодный желудок.
  • Материал отправляется в лабораторию, где из крови получают сыворотку, в которой находятся антитела.
  • Сыворотку помещают в пробирки с наборами антигенов. В практике таких наборов применяется много. Это могут быть разные аллергены (пыльца, шерсть, цитрусовые, молоко и другие), возбудители инфекционных и вирусных заболеваний и другие.
  • После получения реакции остатки сыворотки сливают. Количество антител определяют при помощи специальных индикаторов.

Сроки изготовления анализа

Срок выполнения зависит от конкретной лаборатории. Некоторые лаборатории предоставляют результаты в течении 1-2 дней , другие в течение 1 недели. Задержки могут быть из-за накопления определенного количества сывороток.

Подготовка к исследованию

Перед сдачей анализа следует придерживаться простых правил подготовки:

  • Исключить прием любых медикаментозных средств накануне анализа. Если это невозможно, обязательно поставьте в известность врача, назначающего диагностику. Особое внимание уделяется лекарствам от аллергии. Если пациент принимает антигистаминные препараты, следует проконсультироваться с врачом, за сколько до начала исследование нужно их отменить. Это касается и некоторых лекарств для щитовидной железы. Иначе концентрация ТТГ может быть определена неправильно и результат нормы и патологии будет получен неверно. Как правило, в норме антибактериальные, противовирусные, антигистаминные препараты прекращают принимать за 10-16 дней до диагностики .
  • Кровь забирается строго натощак . Последний прием пищи в норме должен быть за 8-12 часов до поездки в лабораторию.
  • Нельзя принимать алкогольные напитки и курить, иначе это повлияет на норму результатов.
  • Следует исключить любые стрессовые факторы, физические нагрузки. Обязательно хорошо выспаться.

Все, что вам необходимо знать про анализ на примере одной из лабораторий

Что может повлиять на результаты?

Анализ ИФА — достаточно точный метод исследования. Погрешности возникают в случаях:

  • нарушении процедуры взятия материала;
  • при неправильной транспортировки и хранении материала;
  • во время приема некоторых медикаментозных средств (препараты для щитовидной железы, например, которые могут повлиять на концентрацию ТТГ);
  • при наличии скрытых заболеваний (в том числе ЗППП, хламидии, например), нарушениях обмена веществ, иммунодефиците;
  • в период новорожденности, когда в норме в организме присутствуют еще материнские антитела.

Расшифровка, значения (нормы и патологии)

Когда анализ будет готов, пациент получает бланк, где указываются отрицательные (-) и положительные (+) результаты определения каждого класса иммуноглобулинов. Интерпретация может быть такая:

  • На выздоровление пациента указывают отрицательный результат IgM , без определения IgA, IgG.
  • Хроническое инфекционное заболевание подразумевает расшифровка: (-) IgM и отрицательный, положительный IgG, IgA.
  • Об отсутствии защитной реакции к инфекциям указывают (-) значения IgM, IgG, IgA.
  • Острая инфекция обнаруживается при отрицательном или положительном IgG и IgA, (+) IgM.
  • Постинфекционный иммунитет при (-) IgM, IgA и положительном значении IgG.
  • Обострение хронического заболевания — (+) показателях IgM, IgG, IgA.

Наглядная демонстрация ИФА анализа

Где сделать?

Анализ крови методом ифа считается востребованной диагностикой и предлагается различными лабораториями, клиниками города.

В Москве анализ ИФА можно сделать:

  • в лаборатории Ниармедик,
  • Инвитро,
  • Царской клинике,
  • Дельтаклинике,
  • ЛДЦ Кутузовском,
  • МедЦентрСервисе,
  • сети Онклиник,
  • Чудо докторе,
  • Семейном докторе,
  • К+31,
  • ООО Медицине и других.

В Санкт-Петербурге анализ ИФА проводится

  • в Мэдисе,
  • Американской медицинской клинике,
  • Клинике доктора Филатова,
  • Medem,
  • Клинике Доктора Пеля,
  • Лека-Фарм,
  • Инклиник,
  • Экспрессе и других.

Очень полезный учебный фильм про анализ ИФА

Стоимость исследования

Складывается от количества нужных маркеров. Чем больше маркеров, тем выше цена.

Цена на определение антител к

  • цитомегаловирусу Igm/IgG варьируется в пределах 350-700 рублей,
  • к микоплазме 340-520 рублей,
  • к кандиде 320-450 рублей,
  • Анти-Хламидия tr. IgA + Анти-Хламидия tr. IgG 1000-1300,
  • антитела класса IgM к Хламидии 500-600 рублей и т.д.
  • Забор крови в среднем составляет 150-250 рублей.

Некоторые клиники и лаборатории предоставляют услугу отправки результатов по электронной почте. Услуга бесплатна.

Диагностика ИФА занимает особое место в диагностике заболеваний.

Она характеризуется широким спектром действия , быстротой и удобством проведения, высокой точностью результатов, приемлемой стоимостью. Она востребована, поэтому доступна в разных клиниках и лабораториях города.

В перечень стандартных диагностических мероприятий, применяемых для инфекционных заболеваний, входит иммуноферментный анализ. Если ИФА на сифилис положительный, не стоит сразу впадать в панику.

Рассмотрим подробнее особенности этой методики исследования и принципы расшифровки полученных результатов у разных категорий пациентов.

Иммуноферментный анализ является одним из наиболее распространенных методов диагностики инфекционных заболеваний. Он относится к категории трепонемных тестов, то есть с его помощью можно установить наличие в организме пациента возбудителя сифилиса – бледной трепонемы.

Методом ИФА сифилис обнаруживается благодаря выявлению антител к трепонеме. Они содержаться в крови больного, причем их тип и количество зависят от стадии и формы заболевания, что позволяет получить важную информацию о текущем состоянии здоровья человека.

Преимущества и недостатки

ИФА очень часто назначается при подозрении на сифилис или другие инфекционные заболевания. Это обусловлено тем, что анализ позволяет выявить точный тип и стадию заболевания, причем его достоверность сохраняется на высоком уровне – вероятность ошибки по итогам многократного исследования составляет всего 1%, первичный ИФА имеет точность около 90%.

Использование качественных реактивов и современного оборудования позволяет максимизировать точность показателей.

В целом преимуществами метода являются:

  1. Высокая точность результата . Вероятность получения ложных данных очень мала.
  2. Минимизация человеческого фактора влияния. Современное оборудование для проведения ИФА исключает влияние человека на итоги исследования за счет автоматизации процесса.
  3. Выявление конкретных антител . Спутать антигены одного вида с другими невозможно, поэтому анализ показывает точный результат по конкретному диагнозу.
  4. Фиксация малейших отклонений от нормы . Даже самая незначительная концентрация патологических агентов не останется без внимания.

Не стоит забывать и о слабых сторонах этого метода. ИФА обладает следующими недостатками:

  1. Высокая цена. Высокая стоимость обусловлена многими факторами, в частности, необходимостью хорошего оборудования, качественных реагентов и специалистов с достаточным уровнем подготовки.
  2. Необходимость постановки предварительного диагноза. Нужно знать какие именно антигены искать, так как без дополнительных данных поставить точный диагноз будет невозможно.
  3. Вероятность ложноположительного результата. Некоторые состояния организма и прочие факторы могут исказить итоговые данные.

Показания к проведению

Врач может назначить проведение иммуноферментного анализа для диагностики не только сифилиса, но и ряда других инфекционных заболеваний.

Если рассматривать ситуацию непосредственно с заражением трепонемой, поводом для обследования могут стать:

  • появление внешних симптомов заболевания (шанкры, сифилитическая сыпь, гуммы и т.д.);
  • существенное понижение иммунитета;
  • выявление или подозрение на сифилис у полового партнера, близких и членов семьи;
  • положительная реакция при проведении других тестов;
  • выявление других заболеваний, которые могут быть связаны с сифилисом;
  • личное пожелание человека пройти обследование.

Способы проведения

ИФА может проводиться разными способами. В каждом конкретном случае подбирается наиболее подходящий вариант.

В первую очередь, существует разделение методов на:

  1. Качественный. Выявляется наличие инфекции или вируса в организме пациента.
  2. Количественный. Определяет концентрацию антител к патогенному агенту в организме человека, что указывает на стадию и интенсивность развития заболевания.

Также существует классификация способов проведения ИФА по принципу воспроизведения необходимой реакции.

Различают 3 варианта:

  1. Прямой . Меченные антитела вводятся в предоставленные образцы крови.
  2. Непрямой с антигенами. Предварительно производится размещение сорбированных антигенов в ячейки полистирольного планшета, предназначенного для проведения ИФА. Затем к ним добавляются антитела вирусов, что провоцирует образование иммунных комплексов, необходимых для дальнейшей оценки результатов.
  3. Непрямой с антителами. Для венерических заболеваний часто используется именно этот способ. Он предполагает предварительное сорбирование антител, лишь затем на планшет добавляют антигены.

Правила забора материала

Для того чтобы сократить риски получения недостоверных результатов, необходимо правильно сдать кровь для анализа.

Перед прохождением ИФА нужно соблюдать некоторые ограничения:

  • избегать интенсивных физических и эмоциональных нагрузок;
  • отказаться от курения и приема алкоголя минимум за 1 — 3 дня;
  • на несколько дней нужно перейти на правильное питание;
  • женщинам желательно контролировать фазу менструального цикла, так как гормоны способны исказить результаты;
  • последний прием пищи должен быть за 8 — 10 часов до сдачи крови;
  • за 10 дней исключается прием лекарств, которые могут повлиять на результаты исследования.

Для ИФА берется венозная кровь из локтевой вены, сдавать ее нужно утром натощак. В целом применяются стандартные правила подготовки к забору венозной крови. В зависимости от того наличие какого заболевания тестируется, могут вноситься дополнительные требования к предварительной подготовке пациента.

Методика проведения

Инструкция по проведению ИФА достаточно проста:

  1. У пациента берется кровь из вены.
  2. Взятый материал проходит подготовку и разделяется на пробы на специальной мелкоячеистой палетке.
  3. Проводится смешивание антигенов с антителами по выбранной методике.
  4. Оценивается реакция. Пробы сравниваются с контрольными образцами, производится качественная и количественная оценка результатов.
  5. Данные заносятся в специальную таблицу с приложением количественных показателей (суммарные антитела).
  6. Лечащим врачом производится расшифровка результатов. При необходимости назначается соответствующее лечение.

После проведения исследований пациенту выдается документ с результатами. Он имеет вид таблицы с соответствующими обозначениями напротив каждого типа иммуноглобулина на пересечении с наименованиями инфекционных заболеваний.

Расшифровка

Только специалист сможет грамотно расшифровать результаты анализов. Самостоятельно трудно разобраться, например, что означает результат ИФА к=1 4. Сифилис к тому же может протекать в разных формах, что также отражается на итоговых данных.

В результатах указываются 3 вида иммуноглобулинов:

  1. IgM . Позволяют определить срок заражения сифилисом. Положительный результат свидетельствует об обострении заболевания. Их отсутствие может указывать на ремиссию хронических патологий или скрытую форму болезни.
  2. IgA. Указывает на заболевание, с момента заражения которым прошло больше месяца. Также является признаком острой фазы болезни, причем как при обычных патологиях, так и запущенных хронических.
  3. IgG . Является признаком пикового периода заболевания, то есть его обострение. При сифилисе положительная реакция проявляется некоторое время после прохождения лечения. При некоторых видах заболеваний может быть признаком выработанного иммунитета.

Эти вещества вырабатываются организмом в определенной последовательности, что является дополнительным признаком болезни. При качественных тестах устанавливается лишь присутствие иммуноглобулинов в крови каждого типа.

Это выражается в изменении цвета материалов, участвующих в анализе. Количественные показатели являются вспомогательными, они более точно описывают ситуацию. Соотношение антигенов и антител указывает на степень тяжести заболевания и интенсивность ответных действий организма.

Что делать

Если у пациента действительно имеется сифилис, положительный ИФА обнаруживается абсолютно всегда, не заметить присутствия трепонем при таком исследовании невозможно. Не стоит отчаиваться, заболевание хорошо поддается лечению, особенно на начальных стадиях.

Что необходимо делать при положительных результатах теста:

  • по показаниям врача пройдите дополнительные обследования;
  • пройдите курс антибиотикотерапии по выбранной схеме;
  • направьте усилия на укрепление иммунитета;
  • сообщите о заболевании своему половому партнеру;
  • в дальнейшем регулярно проходите профилактическую диагностику до момента снятия с учета в диспансере (через 5 лет при отсутствии положительных результатов анализов).

Не нужно откладывать уход на больничный и бояться огласки результатов. Диагноз шифруется и остается в секрете, лишь при угрозе инфицирования других людей необходимо сообщить о проблеме родственникам и половому партнеру, чтобы они прошли требуемые обследования.

Ложноположительный результат и его причины

Иногда фиксируется результат других тестов и ИФА ложноположительный на сифилис. Именно поэтому рекомендуется проводить 2 — 3 вспомогательных метода и через некоторое время повторять иммуноферментный анализ.

Подобные неточности встречаются редко, они обусловлены преимущественно такими факторами:

  • беременность;
  • хронические заболевания;
  • недавняя вакцинация;
  • травмы.

Ложноположительные результаты разделяют на острые и хронические, в зависимости от характера спровоцировавшего их фактора.

Основные из них представлены в таблице:

Название и фото Краткое описание
Беременность

Плод и генетический материал отца расцениваются, как чужеродные агенты.
Острая форма
Инфекция

Происходит выработка иммуноглобулинов для борьбы с заболеванием.
Травма

Организм реагирует воспалительным процессом, может произойти сопутствующее инфицирование.
Интоксикация

Возникает при отравлении токсическими веществами или проникновении некоторых патогенных микроорганизмов.
Инфаркт

Острые проблемы с сердцем создают существенную нагрузку на организм и вызывают ряд десенсибилизирующих реакций.
Вакцинация

Введение вакцины влияет на выработку иммуноглобулинов.
Хроническая форма
Туберкулез

Подобную реакцию проявляет запущенная форма туберкулеза.
Патологии печени

Нарушается работа всего организма.
Аутоиммунные заболевания

При подобных сбоях выработка иммуноглобулинов может быть необоснованной наличием антител.
Болезни соединительной ткани

Преимущественно являются генетическими патологиями и иногда «сбивают» результаты обследований.
Возрастные изменения

У пожилых людей иммунная система работает со сбоями, к тому же имеется множество хронических болезней.

При наличии подобных проблем со здоровьем тест на сифилис может показать положительный результат, но это является лишь следствием выработки организмом белков для борьбы с заболеванием. Однако ИФА распознает их, как антигены.

У здорового ребенка до полуторагодовалого возраста могут наблюдаться ложноположительные результаты ИФА, если женщина во время беременности была инфицирована сифилисом. До этого возраста кровь еще не успевает полностью обновиться, поэтому в ней могут присутствовать антитела матери. Исключение составляет ситуация с обнаружением иммуноглобулинов IgM.

Больше информации об особенностях иммуноферментного анализа и методике его проведения вы можете узнать, посмотрев видео в этой статье.

Благодаря развитию современной медицины, врачу при постановке диагноза больше не нужно ориентироваться на косвенные проявления заболеваний или проводить многоступенчатые лабораторные исследования. Достаточно провести один анализ, который подтвердит или опровергнет предполагаемый первоначальный диагноз.

Таким методом является иммуноферментный анализ (ИФА) — это исследование позволяет обнаружить специфические антитела и антигенны свойственные при разнообразных патологиях, что во многом ускоряет установку диагноза.

ИФА анализ — это такоелабораторное исследование (метод), которое помогает определить присутствие или отсутствие определённых антител в организме для борьбы с вирусом и их количество.

Основой исследования является естественная реакция антиген (вредоносный организму объект) – антитело (белок уничтожающий вредоносные объекты), позволяющая выявить присутствие разнообразных вирусов, бактерий.

ИФА представляет собой естественный иммунный ответ организма – взаимодействие антитела с соответствующим антигеном. Так во время ИФА в пробирку с материалом добавляются поочередно антигены или антитела, после чего происходит выявление концентрации получившихся комплексов антиген-антитело.

Если совпадения образовались, то возникают иммунные комплексы, далее происходит ферментная реакция красящего вещества с объединённой молекулой. Именно благодаря изменению цвета в ходе ферментативной индикации происходит идентификация заболевания после исследования уровня определяемого соединения.

Виды иммуноглобулинов

Иммуноглобулины человека дифференцируются на несколько классов, отличающихся друг от друга свойствами, структурой и антигенными особенностями тяжелых цепей (Н-цепи). У всех млекопитающих, в том числе и человека, выделяют пять Н-цепей, которые и определяют принадлежность иммуноглобулинов к соответствующему классу: G, М, A, D, Е.

Каждый класс отличается друг от друга биологическими свойствами, и способностями связывать антигены, и скоростью и прочностью связи с молекулой.

Функции каждых иммуноглобулинов (lg) различны:

Кол-во в организме Функции Период полураспада (дней) Значение
G 70% Формируют пассивный иммунитет у новорожденного;

необходимы для иммунного ответа

улучшают фагоцитоз,

21-24 обеспечивают длительный гуморальный иммунитет при инфекционных заболеваниях
М 5-10% нужны для активации фагоцитоза,

способны связать 5 молекул антигена,

5 Обеспечивает первичную иммунную реакцию
А 10-15 Нейтрализуют токсины и вирусы

нужны для формирования раннего иммунитета

Возникновение иммуноглобулинов происходит по своеобразной «цепочке» — lgM lgG, именно так реагирует организм на появление в организме антигена. Во время лабораторной диагностики проводится оценка концентрации трех основных иммуноглобулинов – G, M, A.

Показания к сдаче анализа на иммуноглобулины

ИФА-анализ с каждым годом становится все более популярным.

Такое исследование ускоряет постановку диагноза, а это очень важно для терапии таких патологий как:

  • вирусный гепатит;
  • ВИЧ-инфекция;
  • цитомегаловирус,
  • вирус Эпштейна-Барр,
  • вирус герпеса,
  • краснуха,
  • туберкулез,
  • сальмонеллёз,
  • дизентерия,
  • клещевой энцефалит,
  • бактерии хеликобактер,
  • боррелиоз,
  • столбняк,
  • сифилис,
  • дифтерия,
  • лептоспироз,
  • хламидиоза,
  • уреаплазмоз,
  • микоплазмоз,
  • коклюш.
  • плоскими червями
  • аскаридами
  • гистолическими амебами,
  • печеночными тремадами,
  • лямблиями,
  • токсоплазмами,
  • трихинеллами,
  • двуусткой,
  • цестодозами.

ИФА является своеобразным маркером аутоиммунных патологий и злокачественных новообразований.

Подготовка к сдаче анализа

При подготовке к исследованию следует придерживаться таких правил:

Так же врачи рекомендуют придерживаться специальной диеты – исключить жирную и жареную пищу, а если исследование проводится на гепатиты, то необходимо не употреблять любые оранжевые овощи и особенно цитрусовые. Сдавать кровь следует с утра на голодный желудок.

Ложноположительным анализ бывает из-за невыполненных рекомендаций, особенно употребления жирной пищи, что приводит к слишком большой концентрации триглицеридов в плазме, из-за чего проводимость ИФА снижается.

Порядок взятия пробы

В качестве исследуемого материала может использоваться цельная кровь, сыворотка или плазма венозной крови. Забор материала, обычно проводится из локтевой вены, для этого применяется одноразовая игла и вакуумная пробирка, необходимо 5-10 мл крови.

Для точности результата важно придерживаться правильной техники взятия пробы – прокол самого сосуда и окружающих тканей должен быть произведен одной манипуляцией, поэтому используется короткая игла с большим диаметром, благодаря чему не травмируется противоположная стенка вены и не повреждаются эритроциты.

Так же для сохранения целостности эритроцитов, нужно чтобы кровь стекала по стенкам пробирки.

Во время хранения материала следует избегать возможной его ионизации, кроме того материал не должен контактировать с остатками дезинфицирующих средств, поэтому используется только одноразовая пластиковая пробирка, с маркировкой ФИО пациента, датой и временем сдачи материала.

Если необходимо непродолжительное хранение исследуемого материала, то используется холодильная камера с температурой 2-4 о С, если необходимо более продолжительное хранение, то материал замораживается при температуре -20 о С.

Как делают анализ

После подготовки исследуемого материала врач-лаборант приступает к необходимым манипуляциям. Для этого используются ряд специальных наборов антигенов, обдающих свойством спровоцировать ответные реакции организма на раздражитель, это разнообразные инфекции, гормоны, аллергены.

Схема ожидаемой реакции «антиген-антитело» выглядит приблизительно так:

  • Первичная реакция — определяемый Ig (Ab) и очищенный антиген возбудителя (Ag).
  • Для обнаружения получившихся иммунных комплексов далее следует новая иммунологическая реакция, где антигеном выступает связанный специфический Ig, а антителом для него выступает коньюгат- Ig (Ab).
  • Последний этап — ферментативная реакция, вместе с катализатором молекулой коньюгата. Субстратом выступает хромоген (не окрашенный), который в процессе протекания реакции окрашивается, и интенсивность цвета и определяется количественный показатель иммуноглобулина в пробе.

В настоящий момент разработано множество разнообразных вариантов ИФА, четкая классификация их отсутствует. Обычно, методы рассматриваются исходя из разделения её на гетеро- и гомогенные — все фазы анализа происходят с применением твердой фазы или с использованием только раствора.

Современные клинико-диагностические лаборатории обычно используют гетерогенный (твердофазный) ИФА, в нем под твердой фазой подразумевается абсорбция антигенов или антител на твердой поверхности специальных лунок, расположенных на полистироловом микропланшете, метод подразделяется на прямой и непрямой ИФА.

При прямом ИФА, вносимый антиген закрепляет в период инкубационного процесса на поверхности пустых лунок, для этого исследуемые пробы материал помещают в чистые лунки на 20-25 минут, это нужно для прикрепления антигена к их поверхности. После этого происходит добавление необходимого антитела. Далее материал остается на определенное время для образования связей.

Антитела всегда добавляют в избытке, поэтому даже при их наличии в пробе остаются не связанные антигены, а если антигенов нет совсем, то связей не будет. Чтобы удалить«лишние» антитела проводится декантация, после чего остаются только те антитела, которые создали связь с антигеном.

После этого следует ферментативная реакции – добавление в лунки раствора с ферментом, после чего происходит окрашивание полученных связей.

При непрямом методе ИФА используемые антитела, заранее соединенные с субстратом ферментативной реакции; в этом случае связь антител с антигеном происходит в период инкубационного процесса, после чего происходит мобилизация связей на поверхности лунок, а вносимый после конъюгат и субстратно-хромогенный реагент окрашивают реакцию.

Таким образом, главным отличием непрямого от прямого метода является не приклеивание материала к поверхности чистых лунок, а связывание с антигеном, иммобилизованным на планшете.

Останавливается протекание реакции с применением специализированных устройств, далее каждая лунка подвергается процессу фотометрирования, за которым следует сравнительная характеристика полученного результата с проведенными ранее контрольными пробами.

Если обнаруживается повышение оптической плотности в пробе, то завышена и концентрация специфических антител в исследуемом результате.

Когда будет готов анализ

Проведение исследования не занимает много времени, от забора крови до получения результата проходит от 1 до 10 дней, в зависимости от диагностических мероприятий.

Результаты теста и их расшифровка

На полученном пациентом бланке-результате диагностики указывается отрицательный либо положительный результат на определенные классы иммуноглобулинов, так же указывается количественный показатель различных классов антител.

Возможны различные интерпретации результатов:

  1. IgM (+) (IgA, IgG не определялись) – процесс выздоровления;
  2. IgM (-) ;IgG (+), IgA (+) – хроническая инфекционная патология;
  3. IgM, IgG, IgA (все с – значением) – отсутствие защитных механизмов к инфекциям;
  4. IgG (+/-) и IgA (+/-), IgM (+) – острый процесс;
  5. IgM (-), IgA(-),IgG(+) – постинфекционный иммунитет;
  6. IgM, IgG, IgA (+) – хроническая патология в стадии обострения.

Так, например, если были обнаружены IgG и IgM, то возможно у пациента одно из таких заболеваний:

  • вирусный гепатит;
  • цитомегаловирус;
  • герпес;
  • ветряная оспа;
  • хламидиозом;
  • стафилококковая или стрептококковая инфекция.

Иммуноферментный анализ часто назначается при гормональных исследованиях, нормы показаны в таблице:

Название гормона Пол Норма
1 тиреоглобулин м/ж До 70 МЕ/мл
2 тироксин м/ж 64-146 нмоль/л
3 трийодтиронин м/ж 1,8-2,8 нмоль/л
4 Свободный тироксин м/ж 11-25 пмоль/л
5 Свободный трийодритонин м/ж 4,49-9,3 пмоль/л
6 Тестостерон, дегидротестостерон Ж 0,5-10 мЕд/л

ИФА анализ — это такое диагностическое исследование, которое позволяет оценить вероятность образования онкологических патологий. Однако интерпретация результатов проводится только лечащим врачом.

Значение результатов теста

ИФА подходит для выявления разнообразных форм половых инфекций, в том числе сифилиса, часто используется и для скрининга беременных.

Благодаря этому исследованию можно узнать, как давно произошло заражение и стадия заболевания на момент исследования:

  • иммуноглобулины М говорят о длительности заболевания;
  • IgA — пациент заразился более 30 дней назад;
  • IgG обнаруживается на «пике» заболеваний, или же в тот момент, когда терапия окончилось недавно.

В процессе исследования лунки на планшете с отрицательным показателем остаются бесцветные, а положительные окрашиваются в ярко-желтый цвет. Если цвет положительных лунок не совпадает с цветом контроля, то результат считается сомнительным и необходимо повторное исследование.

Иммуноферментный анализ — это первая ступень в диагностике ВИЧ. Проводить анализ нельзя сразу же после предполагаемого заражения необходимо дождаться окончания инкубационного периода (от 14 дней до 6 месяцев).

В ходе анализа определяются антитела к ВИЧ-1 и ВИЧ-2, происходит поиск АТ класса G, который обычно появляется на более поздних сроках и АТ класса А и М, они могут быть определены на ранних стадиях (во время инкубационного периода).

  • если первый тест дал положительный результат, то кровь вновь перепроверяется другим лаборантом;
  • повторный положительный результат предполагает пересдачу материала,
  • при повторении результата, пациенту назначается иммуноблотинг.

Окончательный вывод о наличии ВИЧ-инфекции выдается только после результата иммуноблотинга.

ИФА также применяется в качестве диагностического исследования туберкулеза, но если у пациента даже и были выявлены антитела к данной патологии, то это не всегда подтверждает наличие у него туберкулеза, поэтому ИФА часто применяется качестве уточняющей методики, либо же для диагностики скрытой внелегочной формы.

IgG- хроническая стадия инвазии

IgA – заражение произошло более 30 дней назад
IgG – инвазия находится в острой фазе
IgG – подтверждает диагноз и показывает эффективность терапии

Плюсы и минусы анализа

ИФА имеет множество достоинств, что и объясняет его популярность среди врачей и пациентов, это:

  • высокая точность результата,
  • доступная цена,
  • быстрый результат,
  • выявление стадии заболевания,
  • контроль заболевания в динамике.

Однако наравне с достоинствами существует и недостаток – в редких случаях анализ бывает ложноположительным или ложноотрицательным.

Почему результат может быть недостоверным

Ошибки в результате могут возникать из-за технических нарушений, так же недостоверным анализ бывает у людей с некоторыми хроническими заболеваниями (ревматоидный фактор) для которых характерной является выработка специфических антител.

Так же на конечный результат оказывает влияние употребление пациентов медикаментов и нарушение метаболизма. По данным причинам положительный результат на ВИЧ и онкопатологии требует повторную сдачу проб.

Стоимость исследования

Цена ИФА варьируется в зависимости от направления диагностики (руб.):

  • гепатит 250 -900;
  • вирусы – 250 -1000;
  • ВИЧ – 250-350;
  • глистные инвазии – 280 — 900;
  • сифилис -150-250;
  • грибковые инфекции 400-500.

Оформление статьи: Лозинский Олег

Видео о ИФА анализе

Как выполняется анализ ИФА:

Для того, чтобы определить уровень содержания таких биологически активных веществ, как , иммунологические комплексы, требуется провести специальное лабораторное исследование. При подозрении на наличие гематологического, инфекционного или поражающего аутоиммунную систему заболевания специалисты назначают анализ крови на ИФА. По ходу статьи мы с вами рассмотрим, что такое , как к нему подготовиться, что он показывает и как его расшифровать самому.

Что же это за исследование – анализ крови на ИФА? Аббревиатура расшифровывается как иммуноферментный анализ крови, в ходе которого определяется количественное и качественное содержание различных биологически активных веществ, а также антител и антигенов в биологическом материале.

Что используется при иммуноферментном анализе крови:

  • спинномозговая жидкость;
  • слизь уретры, цервикального канала;
  • околоплодная жидкость;
  • содержимое стекловидного тела.

Иммуноферментный анализ назначают с целью диагностирования заболеваний, которые передаются половым путем, инфекционных и онкологических процессов, аллергических реакций, расстройств в работе эндокринной и репродуктивной системах, аутоиммунных и иммунодефицитных заболеваний, а также для оценивания риска развития некоторых , почек.

Обследование крови на ИФА при беременности назначают с целью раннего выявления , нарушений развития на начальных стадиях и контроля их динамики. Кроме того, анализ ИФА позволяет контролировать уровень содержания антител, способных спровоцировать развитие у ребенка тяжелых неврологических расстройств, тем самым предотвращая развитие осложнений не только во время беременности, но и в процессе родов.

Дает возможность заблаговременно отреагировать на выявленные проблемы и в значительной мере укрепить здоровье, как самой мамы, так и ее малыша.

Преимущества ИФА крови относятся:

  • высокая (до 90%) степень чувствительности;
  • возможность раннего установления диагноза, с одновременным определением стадии заболевания;
  • невысокая стоимость реагентов, а, следовательно, доступность;
  • минимальное количество материала для исследования;
  • минимальные сроки получения ;
  • возможность длительного хранения реагентов;
  • способность контролировать динамику развития патологического процесса.

Тест-системы

Минусы иммуноферментного анализа:

  • нельзя конкретизировать возбудителя заболевания, в лаборатории получают только иммунный ответ на него
  • возможность получения ложного результата (в очень редких случаях, преимущественно в период вынашивания беременности).

Подготовка

Принцип данного вида исследования крови базируется на образовании в организме человека специфических антител при попадании в него антигенов, то есть чужеродных агентов, вызывающих развитие того или иного заболевания. В результате их взаимодействия образуются комплексы «антиген — антитело», которые и подвергаются исследованию при осуществлении иммуноферментного анализа.

В связи с этим, чтобы не повлиять на данные комплексы и, соответственно, на достоверность полученных результатов, анализ крови и другого биологического материала на ИФА требует определенной подготовки.

Также за 14 дней до предполагаемого обследования специфическое лечение приостанавливается и употребление антибактериальных, противовирусных лекарственных препаратов прекращается.

Кровь на ИФА сдается из вены. Непосредственно перед забором крови следует ограничить физические нагрузки, а также исключить курение и употребление алкогольных напитков.

Существует несколько методик и способы проведения иммуноферментного анализа: прямой и непрямой способ, конкурентный и метод блокирования.

В основе проведения обследования крови (любого другого биологического материала) на ИФА лежит алгоритм, заключающийся в осуществлении двух реакций – иммунной и ферментативной.

В ходе первой патологические агенты связываются с защитными элементами клеток биологического материала, взятого для исследования. Образуется иммунный комплекс «антиген — антитело». Выглядит это следующим образом. Антигены присутствуют на поверхности абсолютно всех клеток.

При попадании в организм чужеродных клеток происходит их захват иммунными клетками (на чьих поверхностях располагаются антитела), которые сопоставляют данные об антигенах с поверхности вновь поступивших клеток с информацией, заложенной в собственной «памяти». В случае несовпадения этих данных включаются защитные функции организма, заключающиеся в образовании иммунного комплекса.

После этого осуществляют ферментативную реакцию, которая визуализирует результаты предшествующей реакции. Ее принцип основывается на превращении вещества из одного в другое. Для каждого вида ИФА образующего в процессе иммунной реакции материала существует определенный фермент, обработку которым используют для определения концентрации чужеродного агента (по интенсивности окрашивания раствора).


Расшифровка

Благодаря анализу крови на ИФА, лаборанты определяют A, G и M. Положительный результат при исследовании крови (другого биологического сырья) на ИФА дает возможность не только поставить диагноз, но и стадию заболевания, а также характер его протекания (острое или хроническое).

Данные иммуноглобулины при наличии в организме пациента патологического процесса образуются в различные периоды заболевания:

  • Иммуноглобулины М, IgM – образуются через пять дней после начала заболевания и сохраняются в крови в течение 1,5 месяца, после чего исчезают. Выявление IgM указывает на наличие в организме острого первичного патологического процесса и необходимости усиленного терапевтического вмешательства.
  • Иммуноглобулины G, IgG – возникают спустя четыре недели с момента инфицирования, их наличие в организме можно выявить на протяжении нескольких месяцев. Выявление IgG указывает на наличие в анамнезе человека перенесенного заболевания. Повышение уровня их содержания может свидетельствовать также о повторном заражении.
  • Иммуноглобулины А, IgA – появляются в момент заражения и присутствуют в организме в течение четырех недель. Снижение их содержания говорит о начале выздоровления. Появление в анализах вновь после того, как человек прошел курс лечения и выздоровел, свидетельствует о переходе заболевания в хроническую форму. Одновременное выявление в результатах ИФА IgA и IgG также говорит о наличии в организме хронического процесса.

Следует также отметить, что одновременное присутствие в анализах IgG и IgМ указывает на то, что хронический процесс обострился, и пациенту требуется начать лечение. Если же ни один из иммуноглобулинов в ходе обследования не был выявлен, это означает отсутствие иммунного ответа.